2.
Vpliv genskega elektroprenosa na izražanje citosolnih senzorjev nukleinskih kislin in citokinov v humanih celicah in vitro : magistrsko deloTjaša Škerjanec, 2019, magistrsko delo
Opis: Vnašanje tujih nukleinskih kislin v celice z elektroporacijo za zdravljenje rakavih obolenj se trenutno uveljavlja kot vedno bolj učinkovita metoda zdravljenja raka v veterini in medicini. Učinkovitost genskega elektroprenosa je odvisna od fizikalnih dejavnikov električnega polja, vrste vstavljene nukleinske kisline in bioloških dejavnikov tkiva. Genski elektroprenos aktivira številne citosolne senzorje nukleinskih kislin, kar vodi v aktivacijo imunskega odziva z vnetnimi citokini.
Želeli smo ugotoviti, ali je genski elektroprenos nukleinskih kislin citotoksičen in ali povzroči aktivacijo citosolnih senzorjev nukleinskih kislin v humanih celicah melanoma Sk Mel28 ter adenokarcinoma debelega črevesa in danke HT29. Opazovali smo tudi morfološke spremembe celic po genskem elektroprenosu. Ugotovili smo, da genski elektroprenos po protokolu EP2 na celice Sk Mel28 nima citotoksičnega učinka, pri celicah HT29 pa je citotoksičnost odvisna od fizikalnih lastnosti pulzov. Pri opazovanju morfoloških sprememb smo opazili, da po genskem elektroprenosu pri določenem deležu celic pride do apoptoze ali nekroze, tip celične smrti pa je odvisen od fizikalnih lastnosti pulzov. Pri celični liniji Sk Mel28 z genskim elektroprenosom nukleinskih kislin nismo zvišali izražanja genov citosolnih senzorjev nukleinskih kislin, pri HT29 pa smo z genskim elektroprenosom z nekaterimi nukleinskimi kislinami, predvsem s plazmidom Vax, neodvisno od fizikalnih lastnosti pulzov, povečali izražanje genov citosolnih senzorjev DDX60, RIG I in IFI16 ter vnetnega citokina dejavnik tumorske nekroze α.
Ključne besede: genski elektroprenos, elektroporacija, citosolni senzorji nukleinskih kislin, citotoksičnost, melanom Sk-Mel28, adenokarcinom HT29, qPCR, interferonski imunski odziv
Objavljeno v RUP: 23.04.2021; Ogledov: 1963; Prenosov: 60
Povezava na celotno besedilo